Sylvain LEHMANN E-mail : s-lehmann@chu-montpellier.fr Tél. : 04 67 33 71 23 Adresse : Institut de Recherche en Biothérapie Hôpital Saint-Eloi 80, av. Augustin Fliche 34295 Montpellier Cedex 5

Sylvain LEHMANN	PU-PH-TITULAIRE	s-lehmann@chu-montpellier.fr
Monique PROVANSAL	MC-TITULAIRE	monique.provansal@inserm.fr
Audrey GABELLE	PHC-	audreygabelle@hotmail.com
Carole CROZET	CR1-TITULAIRE	carole.crozet@inserm.fr
Danielle CASANOVA	TR-TITULAIRE	danielle.casajnova@inserm.fr

Nos travaux portent principalement sur les maladies à prion qui sont des affections neurodégénératives du système nerveux central (Maladie de Creutzfeldt-Jakob). Elles sont caractérisées par l’accumulation d’une protéine prion pathologique (PrPSc) qui provient de la conversion de la protéine normale (PrPC).
A l’heure actuelle il n’y a pas de traitement disponible pour ces maladies. Nous développons un nouvelle approche de thérapie génique et cellulaire en utilisant (i) des lentivirus exprimant des mutants dominants-négatifs de la PrP (PrP-DN) qui préviennent le développement des affections à prions et (ii) des cellules souches exprimant ou non, via ces lentivirus, les PrP-DN. Nous avons montré préalablement que ces lentivirus étaient capables d’inhiber la réplication du prion en culture (Crozet, 2004) et in vivo chez la souris (Toupet, 2008).
Notre approche de « médecine régénérative » a pour objectif d’utiliser des cellules saines comme « médicament » pour remplacer les cellules détruites et délivrer en même temps des molécules anti-prion. Nous avons montré en 2011 que des cellules souches embryonnaires (CSE) sont capables, après différenciation et greffe dans des modèles murins de maladie à prion, d’avoir un effet thérapeutique (Relano, 2011).
Nous poursuivons ce projet en générant des CSE transduites avec des lentivirus portant les PrP-DN et en adaptant cette approche aux CSE Humaines (CSEH). Pour cela nous évaluons différents protocoles de différenciation et de greffe et nous produisions les versions humaines des vecteurs lentiviraux thérapeutiques.
Un aspect complémentaire à ces recherches porte sur la neurogenèse adulte dont la compréhension est importante pour optimiser les greffes et qui en soi possède des perspectives thérapeutiques pour traiter les maladies neurodégénératives.
Nous avons montré une co-localisation des prions avec les neuroblastes et les cellules souches neurales (CSN) adultes présents dans les zones neurogéniques. Cette observation est appuyée par des résultats montrant que les CSN adultes répliquent l’agent du prion (soumis pour publication).
En parallèle, nous cherchons à évaluer, grâce à des analyses histologiques cinétiques chez la souris infectée par des prions, le statut de cette neurogenèse adulte au cours de la maladie. Ceci est essentiel pour définir avec exactitude la fenêtre thérapeutique optimale des greffes de CSE et si la neurogenèse adulte est plutôt protectrice ou contribue à la pathologie.
Notre programme nous a amené à développer des outils protéomiques (analyses multiplexe, 2D, spectrométrie de masse) maintenant intégrés dans le laboratoire de Biochimie-Protéomique Clinique de l’IRB. Dans ce cadre nous participons à plusieurs projets destinés à trouver des biomarqueurs caractéristiques de différentes situations pathologiques. Nous travaillons principalement sur les démences dont font partie les maladies à prions et la maladie d’Alzheimer. Le diagnostic biologique de ces affections est en effet réalisé au laboratoire sur du LCR, et notre but est de trouver des biomarqueurs précoces et/ou très spécifiques.
Nous avons publié en 2011 des résultats sur les biomarqueurs d’intérêt clinique dans les démences et dans la maladie d’Alzheimer (Gabelle, 2011). Nous avons également fait le point sur l’utilisation de la spectrométrie de masse quantitative en biochimie clinique (Lehmann, 2011).
Les outils protéomique que nous développons sont aussi très utiles pour explorer la biologie des cellules souches (Provansal, 2011). Par ailleurs, il existe une relation forte entre les maladies à prions et d’Alzheimer qui appartiennent au groupe des « protéinopathies ». Nos recherches sur les prions aussi bien fondamentale, qu’appliquées (thérapie cellulaire, diagnostique) s’étendent ainsi aux autres affections neurodégénératives.

Lapasset L, Milhavet O, Prieur A, Besnard E, Babled A, Aït-Hamou N, Leschik J, Pellestor F, Ramirez JM, De Vos J, Lehmann S, Lemaitre JM. Rejuvenating senescent and centenarian human cells by reprogramming through the pluripotent state.
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Ayrolles-Torro A, Imberbis T, Torrent i Mas J, Toupet K, Baskakov I, Poncet-Montange G, Gregoire C, Roquet-baneres F, Lehmann S, Rognan D, Pugniere M, Verdier JM, Perrier V. Oligomeric-induced activiy by thienyl pyrimidine compounds traps prion infectivity.
J Neurosci 2011. 31(42):14882-92., IF=7.27, SIGAPS=8

Relanos-Gines A, Lehmann S, Bencsik A Eugenia Herva M, Torres JM, Crozet C. Stem cell therapy extends incubation and survival time in prion infected mice in a time window-dependant manner.
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Delmouly K, Belondrade M, Casanova D, Milhavet O, Lehmann S. HEPES inhibits the conversion of the Prion protein in cell culture.
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Provansal M, Jorgensen C, Lehmann S, Roche S. Two Dimensional Gel Electrophoresis Analysis of Mesenchymal Stem Cells.
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Provansal M, Roche S, Pastore M, Casanova D, Belondrade M, Alais S, Leblanc P, Windl O, Lehmann S. Proteomic consequences of expression and pathological conversion of the prion protein in inducible neuroblastoma N2a cells.
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Mougenot AL, Bétemps D, Hogeveen KN, Kovacs GG, Chouaf-Lakhdar L, Milhavet O, Lehmann S, Legastelois S, Pin JJ, Baron TG. Production of a monoclonal antibody, against human α-synuclein, in a subpopulation of C57BL/6J mice, presenting a deletion of the α-synuclein locus.
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Lehmann S, Pastore M, Rogez-Kreuz C, Richard M, Belondrade M, Rauwel G, Durand F, Yousfi R, Criquelion J, Clayette P, Perret-Liaudet A. New hospital disinfection processes for both conventional and prion infectious agents compatible with thermosensitive medical equipment.
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Chasseigneaux S, Pastore M, Britton-Davidian J, Manié E, Stern MH, Callebert J, Catalan J, Casanova D, Belondrade M, Provansal M, Zhang Y, Bürkle A, Laplanche JL, Sévenet N, Lehmann S.
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Crozet C, Vézilier J, Delfieu V, Nishimura T, Onodera T, Casanova D, Lehmann S, Béranger F. The truncated 23-230 form of the prion protein localizes to the nuclei of inducible cell lines independently of its nuclear localization signals and is not cytotoxic.
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